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浮游菌采样器的测试流程,原来可以这么简洁

浏览次数:289发布日期:2022-01-03

    

浮游菌采样器用于制药GMP厂房、乳制品厂房、医院手术室、生物洁净、发酵工业等洁净室和无菌环境中的空气微生物检测以及有关研究教学部门作空气微生物的采样研究。
  浮游菌采样器一种多孔吸入式尘菌采样器。它根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计,采样直接,采样口风速与洁净室内风速基本一致,能更准确地反映洁净室内的微生物浓度。采样时,带尘菌空气高速通过微孔,被撞击在培养皿内的琼脂表面;这些活体微生物在培养过程中,发生动态再水化过程,高速生长,从而更快得出结果。



  浮游菌采样器的测试流程:
  测试方法
  4.1 方法提要
  本方法采用计数浓度法,即通过收集悬游在空气中的性粒子于专门的培养基,经若干时间,在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微数,以此来评定洁净室(区)的洁净度。
  4.2 所用的仪器、设备和培养基
  a)浮游菌采样器;
  b)真空抽气泵;
  c)培养皿;
  d)培养基;
  e)恒温培养箱。
  4.3 浮游菌采样器
  浮游菌采样器宜采用撞击法机理的采样器,一般采用狭缝式采样器或离心式采样器。
  4.3.1 采用的浮游菌采样器须要有流量计和定时器。
  4.3.2 狭缝式采样器的原理
  狭缝式采样器由附加的真空抽气泵抽气,通过采样器的缝隙式平板,将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上,附着的活微粒子经培养后形成菌落,予以计数。
  4.3.3 离心式采样器的原理
  离心式采样器由于内部风机的高速旋转,气流从采样器前部吸入从后部流出,在离心力的作用下,空气中的活微粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上,经培养后形成菌落,予以计数。
  4.3.4 狭缝式采样器的使用要点
  应严格按仪器说明书的要求进行操作。
  4.3.4.1 校验
  采样器须按仪器的检定周期,定期对仪器作检定,以保证测试数据的可靠性。校验的项目有:定时器、转盘转速、流量计。
  4.3.2 每次测试前应按说明书上的规定,先接通电源,启动真空抽气泵,然后调节流量计及定时器。
  4.3.4.3空气采样量根据需要选定。已知采样器的流量(L/min),设定采样时间(min),两者相乘即采样量(L)。
  4.3.4.4 注意事项
  4.3.4.4.1 采样口须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。
  4.3.4.4.2 采样管严禁渗漏,内壁应光滑。
  4.3.4.4.3 采样管的长度应根据测点的高度定,尽量减少弯曲。
  4.4 真空抽气泵
  4.4.1 真空抽气泵的排气量应与采样器匹配。
  4.4.2  宜采用无油真空抽气泵,必要时可在非气口安装气体过滤器。
  4.4.3 真空抽气泵安装的位置须适当,一般装在采样器下面。
  4.5 培养皿
  4.5.1 狭缝式采样器一般采用?150mm×15mm、?90mm×15mm、?65mm×15mm三种规格的硼硅酸玻璃培养皿。可根据所选用采样器选择合适的培养皿。
  4.5.2 离心式采样器采用专用的固形培养条。
  4.6 培养基
  普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。其配制方法见附录A(标准的附录)。
  浮游菌采样器
  4.7 恒温培养箱
  须定期对培养箱的温度计进行检定。
  4.8 测试步骤
  4.8.1 测试前仪器、培养皿表面须严格消毒。
  4.8.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌,用于100级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内。
  4.8.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。
  4.8.1.3采样前,先用消毒剂消毒采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面,采样结束,再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。
  4.8.1.4采样口及采样管,使用前须高温灭菌。如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时,应将管中的残留液倒掉并晾干。
  4.8.1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒。
  4.8.2 狭缝式采样器的采样程序
  4.8.2.1仪器经消毒后先不放入培养皿,开动真空泵抽气,使仪器中的残余消毒剂蒸发,时间不少于5min,并调好流量、转盘转速。
  4.8.2.2 关闭真空泵,放入培养皿,盖上盖子后调节采样器缝隙高度。
  4.8.2.3 置采样口于采样点后,依次开启采样器、真空泵,转动定时器,根据采样量设定采样时间。
  4.8.3 培养
  4.8.3.1 全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
  4.8.3.2 在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于48h。
  4.8.3.3 每批培养基应有对照试验,检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。
  4.8.4 菌落计数
  4.8.4.1 用肉眼直接计数、标记或在菌落计数器上点计,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。
  4.8.4.2 若平板上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
  4.8.5 注意事项
  4.8.5.1 使用前仔细检查每个培养皿的质量,培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。
  4.8.5.2 采取一切措施防止采样管的污染和其他为对样本的污染。
  4.8.5.3 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
  4.8.5.4由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落或培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。

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